蛋白提取

1. 将培养皿中的培养基倾倒干净

2. 对着培养皿的侧壁向培养皿中加入少量pbs溶液以洗涤细胞，之后吸去pbs

3. 向培养皿中加入一定量的裂解液，轻轻摇晃使其浸没过整个皿底，然后用细胞刮刮下皿底的细胞(每个方向大概10-20下)，之后转移至1.5 mL EP管中。 注意：

   1. 裂解液的配置：IP buffer:蛋白酶抑制剂 = 100:1

   2. 大皿加500-1000μL；小皿加200-400μL；六孔板每个孔各加入150-200μL(优先取小值)

4. 使用超声波细胞粉碎机粉碎管中的细胞

5. 将EP管置于高速冷冻离心机中13,000 RPM 离心10min

6. 取上清液205μL转移到新的1.5mL管中，其中5μL用作定量时使用，其余的部分加入50μL Loading buffer 在 ℃中水浴10min

7. 13,000 RPM 瞬离管子盖子上的水珠后保存